譜析淺談:凝膠色譜柱長期放置須注意的細(xì)節(jié)
2021-02-25 09:41:07來源：admin
凝膠色譜柱的應(yīng)用也越來越廣泛，使用過后也要對色譜柱進(jìn)行保養(yǎng)，這樣才能使它的使用壽命更長久，在遇到什么問題時(shí)需采取相應(yīng)的措施。
凝膠色譜柱是以剛性的球型硅膠為基質(zhì)，在其表面通過共價(jià)鍵化學(xué)鍵合親水基團(tuán)而成。凝膠色譜柱的填料具有高性能尺寸排阻色譜所必需的性能，即低吸附性和良好的孔徑分布；其pH適用范圍為2.5-7.5，可以使用與水完全互溶的有機(jī)溶劑，如乙腈、丙酮、甲醇或乙醇等。凝膠色譜柱適合用于分析分離蛋白質(zhì)和多肽類樣品。
凝膠色譜柱專為合成高分子的在高溫下GPC分析而設(shè)計(jì)。盡管高度交聯(lián)的PS/DVB 粒子廣泛應(yīng)用于合成高分子的分析，但是這種粒子會在有機(jī)溶劑中產(chǎn)生膨脹，尤其在高溫下膨脹更為明顯。凝膠色譜柱很好的解決了這個(gè)問題。填料以剛性硅膠為基質(zhì)，經(jīng)過獨(dú)特的表面化學(xué)修飾，在高溫和有機(jī)溶劑中可以保持極高的穩(wěn)定性。此外相對于有機(jī)聚合物填料，HTP SEC填料的剛性結(jié)構(gòu)減小了分離過程中的傳質(zhì)，從而取得更高的分辨率和分離效率。
凝膠色譜柱特點(diǎn)：
1、高柱容量、高分辨率
2、寬的pH范圍 (pH范圍2-8.5)
3、使用壽命長
4、低鹽濃度洗脫，適合LC-MS分析
5、對于生物樣品無強(qiáng)吸附
6、極低的非特異性吸附, 高的蛋白回收率及活性回收率
7、解決多維色譜分析應(yīng)用
凝膠色譜柱的存放。如果色譜柱暫時(shí)不用，存放時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：
1、幾天之內(nèi)的短期放置，凝膠柱則用蒸餾水來沖洗，再把色譜柱的兩頭用密封螺絲密封好即可。
2、如果色譜柱長期不用，僅用上述方法來處理就不行了，這時(shí)應(yīng)使用色譜柱使用說明書中所指明的溶劑來充滿色譜柱，凝膠柱則不能用水了，因柱內(nèi)如果有微生物的生長則會使柱效降低，此時(shí)應(yīng)用0.05%的NaNs水溶液(防腐劑)來沖洗色譜柱，再將色譜柱封嚴(yán)。凝膠色譜柱長期放置時(shí)，一定要將色譜柱的兩端封嚴(yán)，以防止由于溶劑揮發(fā)而造成的柱填料干縮現(xiàn)象，因這可導(dǎo)致柱效的嚴(yán)重降低。
3、色譜柱應(yīng)貯存在室溫下，如果放置于0℃以下的環(huán)境里，柱內(nèi)就會結(jié)冰，這也將導(dǎo)致柱效的降低。
凝膠色譜柱是親水、剛性、化學(xué)和機(jī)械性能很好的球性多孔高聚物。使用pH值范圍是2-12，可以使用含有50%的混合有機(jī)溶劑為流動相。凝膠色譜柱因?yàn)橛写蟮呐抛铇O限和良好的校正曲線線性，所以適合分析多分散系如糖和人造水溶性聚合物。用于分離蛋白質(zhì)、多肽、多糖、DNA、RNA、水溶性的有機(jī)聚合物和其他水溶性大分子樣品等。
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